IMViC TEST
1- Indol test
يجرى هذا الاختبار لغرض التعرف على قابلية بعض انواع من البكترياعلى هدم الحامض الاميني التربتوفان Tryptophan وانتاج الاندول .
يستخدم في هذا الاختبار وسط ماء الببتون Pepton water الغني بالحامض الاميني التربتوفان الذي هو مصدر حلقة الاندول .
يلقح الوسط بالبكتريا ويحضن لمدة 24 – 48 ساعة بدرجة حرارة 37 مئوية ثم يضاف له الكاشف Kovac’s reagent النتيجة الموجبة هي ظهور حلقة حمراء فوق الوسط وهي دليل وجود حلقة الاندول .
اساس العمل :
البكتريا القادرة على تحطيم التربتوفان بوجود انزيم التربتوفاينيز تكسره وتتحرر حلقة الاندول مع حامض البايروفيك ، الاندول بتفاعله مع الكاشف ينتج مركبات حمراء اللون .
مكونات وطريقة تحضير الكاشف s reagent'Kovac:
يتكون الكاشف من :
P-dimethyl aminobenzaldehyde 10gr
Isoamyl or Isobutyl alcohol 150 ml
Concentrated HCl 50 ml
يذاب الالديهايد بالكحول بعدها يضاف الحامض مع التحريك وبصورة تدريجية سيتكون محلول ذو لون شاحب يحفظ في الثلاجة بزجاجة غامقة ويهمل اذا تغير لونه .
2- Methyl red &Voges proskauer test
اختبارين متلازمين او ان احدهما مكمل لفحص الاخر
الوسط المستخدم للفحصين هو نفسه Glucose broth لكن تختلف الكواشف المستخدمة في كل فحص .
اساس العمل :
ان الكلوكوز في بداية الامر خلال عملية الـ Glycolysis يتحول الى حامض البايروفيك Pyruvic acid كل البكتريا تمر بهذه المرحلة بعدها هناك مسالك عدة ليمر بها حامض البايروفيك حسب نوع البكتريا اي كونها هوائية او لاهوائية او اختيارية .
بعض من هذه البكتريا تخمر الكلوكوز منتجة نواتج حامضية مثل الـFormat والـ Acetate وهذه المركبات تخفض الاس الهيدروجيني للوسط ويمكن الكشف عنها باستخدام كواشف كيميائية مثل Methyl red
مكونات الكاشف Methyl red :
Methyl red indicator 0.1 gr
Ethyl alcohol 95% 300ml
Dist. Water 200 ml
توضع في الثلاجة في قنينة غامقة (بنية )
اما البعض الاخر من البكتريا فتستخدم مسار اخر لتخمر الكلوكوز اذ تكون نتيجتها مركبات مثل الاسيتوين Acetoin (Acetyl methyl carbinol)والبيوتانيدول Butanidol هذه النواتج تميل الى التعادل ولها خاصية انتاج لون احمر مع كاشف الالفانفثول الموجود في محيط قاعدي .
كواشف اختبار Voges proskauer
Reagent A alphanaphthol 5gr +Ethyl alcohol 100 ml
Reagent B KOH 40 gr in 100 ml Dist.water
طريقة العمل :
تزرع البكتريا في وسط Glucose broth الموجود في انبوبتين واحدة لفحصMethyl red والثانية لفحص Vogas كل انبوبة تحوي 2.5 مل من الوسط وتحضن 48 ساعة بحرارة 37 مئوي.
بعد الحضن تضاف للانبوبة الاولى 0.5 مل من كاشف Methyl red والانبوبة الثانية يضاف لها 0.6 مل من Reagent A و0.2 مل من Reagent B
ترج الانابيب برفق وتترك لمدة 15 دقيقة .
النتيجة الموجبة لفحص المثيل هو اللون الاحمر والنتيجة السالبة هو اللون الاصفر
النتيجة الموجبة لفحص Vogas هو اللون الوردي Pink او الاحمر والنتيجة السالبة هي اللون الاصفر
ملاحظة : البكتريا التي تعطي نتيجة موجبة للفحص الاول تعطي سالبة للثاني والعكس صحيح .
3-اختبار استهلاك السترات Citrate utilization test
تتمكن بعض انواع من البكتريا من استهلاك السترات كمصدر وحيد للكاربون وتستخدم هذه القابلية للتفريق بين انواع من البكتريا.
يستخدم الوسط Simmon citrate في هذا الفحص وهو يحتوي على السترات كمصدر وحيد للكاربون ويحوي على كاشف Bromothymol blue يلقح الوسط بالبكتريا وتحضن بحرارة 37 مئوي لمدة 24 ساعة .
لون الوسط اخضر اذا البكتريا استهلكت السترات ستنتج مواد قاعدية وبوجود الكاشف سيتغير لون الوسط الى اللون الازرق .
ملاحظة:
غالبا يستخدم فحص IMVic للتفريق بين انواع البكتريا المعوية لكنه غير كافي لوحده ولاكمال التشخيص تزرع البكتريا على الاوساط التالية :
Urea agar or broth ,Kligler iron agar or TSI agar , Motility media (Semi solid mannitol)
الرئيسية 
