دليلك لجمع عينات المايكروبيولوجي

دليل جمع العينات

عندما

يعين الطبيب نوع التحاليل المطلوبة للمريض فانه يتم جمع العينات من قبل
الممرضة إذا كان في الأقسام الداخلية او من قبل فني المختبر إذا كان
المريض في العيادات الخارجية .
هناك تعليمات خاصة من الضروري تطبيقها لتهيئة المريض للحصول على العينة
المطلوبة بالصورة الصحيحة وتختلف هذه الإجراءات باختلاف التحليل المطلوب
ونوع العينة .


طلب التحاليل :



بعدما يعين الطبيب نوع التحاليل المطلوبة تقوم الممرضة المسئولة بتعبئة جميع بيانات الطلب كاملة تشمل الآتي:
 اسم المريض بالكامل
 رقم ملف المريض
 عمر المريض
 جنس المريض
 جنسية المريض
 اسم الطبيب وختمه وتوقيعه
 نوع العينة
 تاريخ و وقت جمع العينة
 اسم الممرضة التي جمعت العينة وتوقيعها
 نوع التحاليل المطلوبة
 أسماء الأدوية أو المضادات التي يستخدمها المريض إن وجدت



عينات البولUrine samples

جمع عينات البول
يعتبر البول وسط ممتاز لتكاثر البكتيريا وعليه يجب أن تجمع عينات البول
لتشخيص التهابات القناة البولية في الانسان ويجب ان يجمع في أوعيه معقمه و
نظيفة(للمزارع البكتيرية) كما يفحص البول عند إجراء التحليل الروتيني
العام خلال نصف ساعة من جمعه .

أهم عينات البول وطرق جمعها:

طريقة جمع عينات البول للمزارع الجرثومية:

قبل البدء بعملية الجمع يجب إتباع التالي :
• على المريض الامتناع عن تناول المضادات الحيوية لمدة 3-5 أيام لتجنب النتائج السلبية الخاطئة
• جمع البول في عبوة معقمة جيدا محكمة الغلق ومناسبة في الحجم


• تنبيه المريض إلى عدم فتح العبوة لفترة زمنية طويلة وعدم ملامسة الجوانب الداخلية للعبوة و إغلاقها مباشرة بعد وضع العينة
• تقنية البول الوسطيMidstream-clean-catch technique
هي أكثر الطرق شيوعا لجمع عينات البول إذ أنها طريقة سهله وتقلل عملية
تلوث العينة بالبكتيريا الموجودة في الاحليل أو المهبل وتتخلص في طرح
الكمية الأولى خارجا ثم وضع الكمية التالية وسط البول في عبوة الجمع وطرح

آخر البول خارج العبوة
وتتم هذه العملية في الذكور بالطريقة التالية :
1)غسل اليدين
2)غسل مقدمة القضيب بالصابون
3)غسل القضيب بالماء المعقم
4)طرح الكمية الاولى من البول خارج العبوة
5)وضع كمية من وسط البول في العبوة ومن ثم اغلاقها جيدا
اما عند الاناث فيتم جمع العينة بالطريقة التالية:
1)غسل اليدين
2)مسح الفرج باسفنجه مغموسة بالصابون من الامام الى الخلف ثم التخلص من الاسفنجة
3)تكرر العملية السابقة ثلاثة مرات
4)غسل الفرج بالماء المعقم
5)التخلص من الجزء الاول من البول
6)وضع ماتبقى من البول في عبوة معقمة واغلاقها جيدا
ملاحظة:يفضل اخذ اكثر من عينة في الاناث لاعطاء دقة في النتيجة




طريقة القسطرة:



يجب عدم اخذ عينة البول من كيس جمع البول المتصل بأنبوب القسطرة حيث ان

عدد البكتيريا الموجوده في الكيس قد زاد وتضاعف اثناء فترة التجميع لان
البول يعتبر وسط مناسب لتكاثر البكتيريا. وعملية القسطرة تقلل من نسبة
تلوث عينة البول في السيدات .




طريقة السحب المباشر من المثانة البولية:




يلجأ
الاطباء في بعض الحالات الى جمع عينة البول عن طريق ابرة معقمة تدخل
مباشرة الى المثانة ثم يتم سحب البول ووضعه في وعاء معقم وتستخدم هذه
الطريقة عند الاطفال اللذين يصعب اخذ عينة البول منهم بشكل طبيعي او في
النساء لتجنب تلوث العينة ببكتيريا الفرج




جمع البول عند الاطفال الرضع:



بالنسبة للاطفال الرضع الغير قادرين على التحكم بعملية التبول لديهم يتم
تثبيت كيس خاص على الفتحة البوليه ثم اغلاق الكيس ونقله مباشرة الى
المختبر







***********************************

ملاحظات هامة:




يجب ارسال العينة مباشرة الى المختبر في مدة لاتزيد عن ساعتين في درجة حرارة الغرفة
اذا تعذر ارسال العينة مباشرة الى المختبر يجب ان توضع في الثلاجة على درجة حرار 2-5م لمدة لاتزيد عن 24 ساعة
يمكن حفظ البول باضافة وسط Becton-Dickinsonكوسط حافظ لعينة البول مع بقاء
العينة بدرجة حرارة الغرفه لمدة24ساعه اذ ان هذه المادة تحافظ على
البكتيريا الموجودة في البول .كما يمكن اضافة طبقة من مادة التولين على
سطح العينة فتمنعها من التلوث الخارجي .


عينات بول الصباح الباكر
تجمع عند الاستيقاظ من النوم وبعد صيام طوال الليل من الساعة الثامنة من

مساء الليلة السابقة والى صباح يوم جمع العينة وتفضل هذه العينة لإجراء
التحليل الروتيني العام للبول وكذلك فحص الحمل





عينات بول نهاري 12 ساعة




يجمع البول خلال 12 ساعة ابتداء من الساعة الثامنة صباحا وحتى الساعة الثامنة مساء نفس اليوم




عينات بول 24 ساعة



بول 24 ساعة يبدأ من الساعة الثامنة صباحا إلى الثامنة صباحا من اليوم
التالي وتستخدم لقياس المكونات الكيميائية للبول او اختبار الدران .


*******************************
المواد الحافظه المستخدمة لحفظ البول


هناك العديد من المواد الحافظة للبول تعتمد حسب نوع التحليل المطلوب ومن هذه المواد الحافظة ما يلي:
حمض الهيدروكلوريك ويضاف 10 مل من الحمض المركز الى بول 24 ساعة ويستخدم لأغلب الاختبارات الكيميائية
التولين يستخدم كمادة حافظه لأغلب التحاليل الكيميائية ويضاف 10 مل لبول
24 ساعة
الهيبتان ويستخدم لحفظ البول المعد لقياس السكر في البول ويضاف 5% للبول
حمض الخليك الجليدي لحفظ عينات البول المستخدمة لاختبار الاسكوربيك أسيد وهرمون الكورتيزون
الفينول والثيمول
الأخطاء الشائعة في جمع عينات البول


هناك العديد من الأخطاء الشائعة أثناء جمع عينات البول:
• استعمال المواد الحافظة غير الناسبة والتي قد تتداخل مع طريقة التحليل الكيميائي
• ضياع بعض عينات البول المطروح نتيجة لإهمال أو خطأ
• ترك البول فتره طويل دون مواد حافظه أو درجه حرارة مناسبة
• يجب إرسال العينات إلى المختبر في اقل من ساعة

عينات الجهاز التنفسي



الجهاز التنفسي العلوي

مسحات الحلق Throat swab



تعتبر مسحات الحلق أفضل وسيلة لتشخيص حالات التهاب الجهاز التنفسي العلوي مثل اللوزتين والجدار الخلفي للتجويف الفمي



طريقة اخذ العينة :



• تستخدم ماسحة قطنية لأخذ العينة



• اطلب من المريض أن يضع وجه باتجاه الضوء ويفتح فمه واسعا



• يتم ضغط اللسان إلى الأسفل بشدة باستخدام ضاغط اللسان



• تمرر باليد الأخرى الماسحة المعقمة فوق اللسان باتجاه مكان الالتهاب دون أن تلامس اللسان أو تلامس أجزاء من التجويف الفمي



• يتم ضغط وتدوير الماسحة على اللوزتين أو في مكان الالتهاب



• تسحب الماسحة مع تجنب ملامسة اللسان أو الشفاه أو جدار الفم



• توضع الماسحة في وسط ناقل وأفضل وسط ناقل يمكن أن يستخدم لحفظ عينات الحلق هو Amis charcoal T.M



• تحفظ العينات مع الوسط الناقل في الثلاجة لمدة لا تزيد عن 24 ساعة



• أما إذا كانت بدون وسط ناقل فيجب أن تزرع خلال 4 ساعات من جمعها



عينات الجهاز التنفسي السفلي


عينات البصاقSputum samples
تجمع عينات البلغم لتشخيص التهابات الجهاز التنفسي السفلي ويتم جمع العينة من أعماق الرئة ويجب مراعاة النقاط التالية :



• يتم جمع العينة بواسطة السعال العميق في عبوة معقمه مع مراعاة عدم اختلاط البلغم باللعاب .




• يجب على المريض المضمضة بالماء والملح ثلاث مرات قبل جمع العينة .



• يفضل جمع العينة قبل تناول المضاد الحيوي وفي الصباح الباكر قبل الإفطار .



• يجب أن يتراوح حجم عينة البلغم المناسبة للزراعة مابين 1-3ملم



• يفضل إعطاء من 6-3 عينات خاصة في مرض السل لزيادة احتمالية عزل البكتيريا المسببة للمرض .



• يمكن حفظ العينة في الثلاجة أو نقلها في صندوق مبرد عند



درجة 2-8 م لفترة لا تزيد عن 3 ساعات .



أما المرضى اللذين يصعب عليهم إعطاء البلغم فيتم إجراء معالجه تنفسية لهم



بحيث يتم إعطاؤهم محلول ملحي فسيولوجي أو مادة مذيبة للمخاط مثل NAOH+



NALC20%)) لمدة 15 دقيقه بطريقة الاستنشاق والتي تساعد المريض على إعطاء



البلغم وتعمل على التخلص من الفلورا الطبيعية الملوثة للعينة .



ويمكن اخذ العينة من الجهاز التنفسي السفلي بعدة طرق أخرى يتم من خلالها



تجنب تلوث العينة ببكتيريا النورمل فلورا للجهاز التنفسي العلوي وهي



كما يلي:



1)السحب من أسفل القصبات Endotracheal aspiration:



تتم عملية السحب من أسفل القصبات عن طريق إدخال أنبوب مطاطي إلى داخل



القصبات وسحب الإفرازات الموجودة فيها من اجل زراعتها . وتستخدم هذه



الطريقة للحصول على العينة من الأطفال الصغار أو من المرضى غير القادرين



على إعطاء العينة بواسطة السعال ويمكن إجراء غسل للقصبات بواسطة كمية من



المحلول الملحي ثم سحب السائل الناتج والمختلط مع إفرازات القصبات من اجل



الزراعة.



2) غسل القصبات والحويصلات الهوائية Bronchalveolar Lavage



تتم هذه العملية بواسطة منظار خاص حيث يتم ضخ أكثر من 50 مل من المحلول



الملحي الفسيولوجي في أسفل القصبات ثم يجمع هذا المحلول مره أخرى من اجل



الزراعة .



3) الخزعة أو السحب المباشر Direct Needle aspiration or Biopsy



تستخدم هذه الطريقة لتجنب تلوث العينة بالبكتيريا الموجودة في الفم ولتشخيص الالتهابات البكتيرية اللاهوائية أو الانتهازية
.


********************************


عينات الأذنEar samples
 الأذن الخارجية



يفضل
تعقيم الأذن الخارجية قبل جمع العينة بكحول أو ايودين للتخلص من النورمل
فلورا ومنعا لتلوث العينة ثم تجمع العينة بواسطة مسحه قطنية معقمه
بتدويرها في مكان التقرح أو الإفرازات .




الأذن الوسطى


يفضل أن يقوم الدكتور
بجمع عينات التهاب الأذن الوسطى بواسطة عملية السحب إلا انه يتم اللجوء في
بعض الحالات إلى جمع الإفرازات الموجودة في القناة السمعية بعد تعقيمها و
ازاله الإفرازات بماسحه واخذ العينة بمسحه أخرى للتقليل من التلوث
الجرثومي للعينة.
ملاحظات أثناء جمع عينات الأذن:


• تبقى صالحه للزراعة لمده ساعتين في درجه حرارة الغرفة

• يفضل استخدام وسط حفظ للعينة

• يجب توفير ظروف لا هوائيه في عمليات النقل للأذن الوسطى

*********************



عينات العينEye samples


تجمع العينة حسب مكان الالتهاب إذ أن كل موقع التهاب معين له طريقة مختلفة للحصول على العينة

وتقسم طرق اخذ عينات التهابات العيون إلى ما يلي:

1)المسحات تؤخذ المسحات في حاله وجود إفرازات في العين باستخدام مسحه قطنية معقمه

سحب جفن العين السفلي إلى الأسفل وادخل الماسحة القطنية ثم اخذ العينة من
أسفل كيس الملتحمة او من التقرحات إن وجدت وفي حاله وجود كمية كبيره من
القيح يتم ازالته بماسحه معقمه ثم رميها وتؤخذ العينة بماسحة أخرى جديدة
ويفضل إرسال العينة مباشرة إلى المختبر ووضعها في وسط ناقل لحفظها لحين
زراعتها .

2) كشط عينات العين :

يتم اللجوء لعملية الكشط في حاله عدم وجود كمية كبيره من إفرازات العين

إذا تستخدم ملعقة من البلاتين لإجراء عملية الكشط من الملتحمة وجفن العين

3) السحب المباشر:

يقوم الطبيب المختص بعمل السحب لتشخيص التهاب العين الداخلي او الدمامل المغلقة


ملاحظات أثناء جمع عينات العين :

• يفضل إرسال العينات مباشرة للمختبر لتعرضها للتلف

• تعتبر العينة تالفة بعد ساعتين من جمعها في درجه حرارة الغرفة

• يمكن أن تحفظ في الثلاجة لمده 24 ساعة

• يجب استخدام وسط ناقل لجمع العينات

• يجب توضيح مكان اخذ العينة من العين اليمنى أو اليسرى ومكان أخذها (مثل الملتحمة أو الجفن ....الخ )

• يفضل اخذ عينتين من مكان الإصابة

• جمع العينة قبل تناول المضاد الحيوي

• يتم تعقيم الجفن بطريقه مشابهه لتعقيم الجلد قبل جمع العينة

*****************************************************


مسحات الجروح والحروقWound swab


يتم


جمع العينات بعدة طرق وهي :




المسحات




هي الطريقة الشائعة لجمع عينات الجروح والحروق من اجل جمع عينة مناسبة وسليمة يفضل إتباع التالي:




1)تعقيم مكان اخذ العينة بشكل جيد وذلك لتلافي تلوث العينة



2)بواسطة مسحه طبية معقمة يتم اخذ العينة من عمق مكان الالتهاب وليس من سطحه




3) في حاله الالتهابات المغلقة يتم فتح الالتهاب بواسطة إبرة أو وخزه ثم اخذ المسحة بشكل جيد وبطريقة معقمه





السحب




تستخدم هذه الطريقة في حاله الالتهابات المتقيحة والعميقة إذا يجب تعقيم الجلد بشكل جيد ثم اخذ القيح بواسطة إبرة معقمه




يمكن استخدام عملية القشط في حالات الالتهابات التي لا تحتوي على قيح مثل الالتهابات الفطرية




طريقة نقل العينات





• يفضل نقل الماسحة مباشرة إلى المختبر و يمكن أن تحفظ في الثلاجة على درجة حرارة 2-8 م لفترة لا تزيد عن ساعة واحدة.





• عينات الكشط التي تستخدم للكشف عن الفطريات تحفظ وتنقل على درجة حرارة الغرفة





• يفضل أن تنقل المسحات في ظروف هوائية




• العينات الماخوذه بواسطة السحب يجب أن تنقل لاهوائيا بواسطة حقيبة مخصصه
لذلك أو بواسطة سرنجة مغلقة بشكل جيد حتى لا يدخل فيها الهواء




• يجب استخدام وسط ناقل مثل وسط Cary-Blair media or Amis مع توفير ظروف لاهوائية عند نقل العينات المسحوبة

عينات البرازStool samples





يفضل اخذ عينة البراز في وعاء خاص 4 مل على الأقل في الصباح إذا كان
المطلوب البحث عن الطفيليات أو الأميبا وترسل العينة إلى المختبر في أسرع
وقت ممكن مع مراعاة التالي :
• لا يجمع البراز من المريض الذي تناول مسهلا أو ملينا أو تناول أملاح الباريوم أو بعد حقنة شرجية مباشرة
• الكشف عن الدم في البراز يجب ألا يأخذ المريض أي مركبات حديد ويتجنب
استخدام فايتمين سي وبعض الماكولات مثل الموز لانها تعطي نتائج ايجابية
خاطئة
• يجب تجنب اختلاط البول مع البراز أثناء جمع العينة
• يجب أن ترسل العينة إلى المختبر خلال ساعة كحد أقصى من جمع العينة أو
توضع في الثلاجة في درجة حرارة من 2-8 م لفترة لا تتجاوز 24 ساعة
• إذا تعذر إرسال العينة أو زراعتها خلال ساعتين من جمعها يجب أن توضع في
وسط ناقل مثل وسط Cary-Blair أو Stuart
ويستخدم ماء الببتون القاعدي Alkaline peptone water كوسط حافظ لنقل
العينات المشكوك باحتوائها على جرثومة الكوليرا ولا يفضل استخدام
الجليسرول كمادة حافظة نظرا لسميتها لبكتيريا ‍Compylobacter
التحاليل الخاصة بعينات البراز:
• التحليل العام ويفحص القيح والجراثيم والديدان والطفيليات والرقم الهيدروجيني
• مزارع الجراثيم للعينة ويجب أن تجمع العينة في وعاء معقم ويفضل جمع من
2-3 عينات في أوقات مختلفة كما يجب ألا يقل حجم العينة عن 2 غم كعينة
كافية للزراعة
• الفحص عن الدم الخفي و يمنع المريض عن تناول اللحوم لمدة ثلاثة أيام

**************************************************



عينات النخاع الشوكيCSF




يوجد
سائل النخاع الشوكي في العمود الفقري ويحتوي على معظم مكونات السيرم فمثلا
يكون تركيز السكر حوالي 60%-80% من تركيزه في الدم اما نسبة البروتين
تترواح بين 15-45 ملجم\ديسليتر
• يعتبر سائل النخاع الشوكي هو العينة المخبرية الرئيسية في تشخيص
التهابات السحايا إذ تعطى مكوناته الخلوية والكيميائية دلائل مهمة على
الإصابة .
• إن سائل النخاع الشوكي صافي ومعقم وقد يحتوي على كريات دم بيضاء تتراوح
مابين 1-6 خلايا\سم2 وتتغير مكوناته مع التهاب السحايا ففي التهاب السحايا
البكتيري يصبح متقيحا نتيجة لوجود عدد كبير من كريات الدم البيضاء ويرتفع
تركيز البروتين ويقل تركيز السكر
• يتم جمع عينات CSF من قبل طبيب مختص بواسطة عملية Aspiration بادخل إبرة
خاصة بين الفقرتين الرابعة والخامسة في العمود الفقري إلى أن يصل إلى
السائل النخاعي لسحبة . وتتم هذه العملية تحت ظروف معقمة إذ يتم سحب 2-5
مل ثم توزع على ثلاثة أنابيب .
• يجب أن تجمع العينة في ثلاث أنابيب نظيفة ومعقمه (في كل أنبوبه 2 مل)
وتستخدم الأولى للاختبارات الكيميائية والثانية للفحوص المجهرية والثالثة
للفحوص الجرثومية ويشترط ألا يكون الأنبوب الأول هو الأنبوب المستخدم
للزراعة لاحتماليه تلوث العينة بالبكتيريا الموجود على الجلد .
• يفضل إجراء الفحوصات بشكل مباشر في اقل من ساعة من اخذ العينة نظرا لحساسية البكتيريا المسببة لالتهاب السحايا للهواء والبرودة
• في حالة المسبب للالتهاب بكتيريا يجب أن تحفظ العينات في درجة حرارة
الغرفة أو في الحضانة على درجة حرارة 35 م لمدة 2-3 ساعات ولا تحفظ في
الثلاجة أما إذا كان المسبب فيروس فيمكن حفظ العينة في الثلاجة لمدة 24
ساعة أو حفظها في درجه حرارة -70 م لفترات زمنية طويلة
******************************************************** .




السائل الزلاليSynovial fluid



يوجد في المنطقة القطنية أسفل الظهر وأسفل العنق ويوجد بكميات قليلة في أي مفصل وخاصة الركبة
تجمع عينات السائل الزلالي في ثلاثة أنابيب معقمة واحد للفحص الجرثومي
والثانية للفحص الكيميائي كما يجب استخدام مادة مانعه للتجلط مثل الاديتا
او الهيبارين والثالثة للفحص الخلوي




سوائل الجسم المختلفةBody fluid



يحتوي

جسم الإنسان على أنواع متعددة من السوائل مثل السائل المحيط بالقلب
pericardial fluid أو سائل البطن peritoneal fluid أوالسائل المحيط بالرئة
pleural fluid وتعتبر جميع هذه السوائل سوائل معقمة وتوجد بكميات قليلة
داخل تجاويف الجسم وتظهر هذه السوائل بشكل متقيح في حالات الإصابات
البكتيرية والالتهابات طريقة الجمع والنقل :




يتم جمع هذه العينات بواسطة طبيب مختص بعد تعقيم الجلد بشكل جيد باليود ومن ثم الكحول
• يتم السحب بواسطة إبرة معقمة
• يفضل سحب حوالي 3-10 ملل ثم وضع العينة في أنبوب يحتوي على مانع تخثر من الهيبارين أو اديتا
• يجب مراعاة ظروف التعقيم خلال جميع مراحل العمل
• يجب إرسال العينة للمختبر في أسرع وقت لان العينة تبقى صالحه للزراعة في خلال ساعتين من جمعها
• يمكن حفظ عينات سوائل الجسم في الثلاجة لمدة لا تتجاوز 24 ساعة
• يفضل نقل العينات في جو يحتوي على ثاني اوكسيد الكربون أو نقلها لاهوائيا وخاصة سوائل المفاصل

yslamoo kteer 2stfdet mn alm3lomat

جزاك الله خيرا