منتدي التحاليل الطبية فلسطين


 
الرئيسيةالرئيسية  س .و .جس .و .ج  بحـثبحـث  التسجيلالتسجيل  دخول  

شاطر | 
 

 IMViC TEST

استعرض الموضوع السابق استعرض الموضوع التالي اذهب الى الأسفل 
كاتب الموضوعرسالة
عاشق التحاليل
عضو متألق
عضو متألق


عدد المساهمات : 95
تاريخ التسجيل : 11/07/2008
العمر : 32

مُساهمةموضوع: IMViC TEST   الأربعاء يوليو 30, 2008 8:17 pm

IMViC TEST



1- Indol test

يجرى هذا الاختبار لغرض التعرف على قابلية بعض انواع من البكترياعلى هدم الحامض الاميني التربتوفان Tryptophan وانتاج الاندول .

يستخدم في هذا الاختبار وسط ماء الببتون Pepton water الغني بالحامض الاميني التربتوفان الذي هو مصدر حلقة الاندول .

يلقح الوسط بالبكتريا ويحضن لمدة 24 – 48 ساعة بدرجة حرارة 37 مئوية ثم يضاف له الكاشف Kovac’s reagent النتيجة الموجبة هي ظهور حلقة حمراء فوق الوسط وهي دليل وجود حلقة الاندول .

اساس العمل :

البكتريا القادرة على تحطيم التربتوفان بوجود انزيم التربتوفاينيز تكسره وتتحرر حلقة الاندول مع حامض البايروفيك ، الاندول بتفاعله مع الكاشف ينتج مركبات حمراء اللون .



مكونات وطريقة تحضير الكاشف s reagent'Kovac:

يتكون الكاشف من :

P-dimethyl aminobenzaldehyde 10gr

Isoamyl or Isobutyl alcohol 150 ml

Concentrated HCl 50 ml

يذاب الالديهايد بالكحول بعدها يضاف الحامض مع التحريك وبصورة تدريجية سيتكون محلول ذو لون شاحب يحفظ في الثلاجة بزجاجة غامقة ويهمل اذا تغير لونه .





2- Methyl red &Voges proskauer test

اختبارين متلازمين او ان احدهما مكمل لفحص الاخر

الوسط المستخدم للفحصين هو نفسه Glucose broth لكن تختلف الكواشف المستخدمة في كل فحص .

اساس العمل :

ان الكلوكوز في بداية الامر خلال عملية الـ Glycolysis يتحول الى حامض البايروفيك Pyruvic acid كل البكتريا تمر بهذه المرحلة بعدها هناك مسالك عدة ليمر بها حامض البايروفيك حسب نوع البكتريا اي كونها هوائية او لاهوائية او اختيارية .

بعض من هذه البكتريا تخمر الكلوكوز منتجة نواتج حامضية مثل الـFormat والـ Acetate وهذه المركبات تخفض الاس الهيدروجيني للوسط ويمكن الكشف عنها باستخدام كواشف كيميائية مثل Methyl red

مكونات الكاشف Methyl red :

Methyl red indicator 0.1 gr

Ethyl alcohol 95% 300ml

Dist. Water 200 ml

توضع في الثلاجة في قنينة غامقة (بنية )

اما البعض الاخر من البكتريا فتستخدم مسار اخر لتخمر الكلوكوز اذ تكون نتيجتها مركبات مثل الاسيتوين Acetoin (Acetyl methyl carbinol)والبيوتانيدول Butanidol هذه النواتج تميل الى التعادل ولها خاصية انتاج لون احمر مع كاشف الالفانفثول الموجود في محيط قاعدي .

كواشف اختبار Voges proskauer

Reagent A alphanaphthol 5gr +Ethyl alcohol 100 ml

Reagent B KOH 40 gr in 100 ml Dist.water

طريقة العمل :

تزرع البكتريا في وسط Glucose broth الموجود في انبوبتين واحدة لفحصMethyl red والثانية لفحص Vogas كل انبوبة تحوي 2.5 مل من الوسط وتحضن 48 ساعة بحرارة 37 مئوي.

بعد الحضن تضاف للانبوبة الاولى 0.5 مل من كاشف Methyl red والانبوبة الثانية يضاف لها 0.6 مل من Reagent A و0.2 مل من Reagent B

ترج الانابيب برفق وتترك لمدة 15 دقيقة .

النتيجة الموجبة لفحص المثيل هو اللون الاحمر والنتيجة السالبة هو اللون الاصفر

النتيجة الموجبة لفحص Vogas هو اللون الوردي Pink او الاحمر والنتيجة السالبة هي اللون الاصفر

ملاحظة : البكتريا التي تعطي نتيجة موجبة للفحص الاول تعطي سالبة للثاني والعكس صحيح .

3-اختبار استهلاك السترات Citrate utilization test

تتمكن بعض انواع من البكتريا من استهلاك السترات كمصدر وحيد للكاربون وتستخدم هذه القابلية للتفريق بين انواع من البكتريا.

يستخدم الوسط Simmon citrate في هذا الفحص وهو يحتوي على السترات كمصدر وحيد للكاربون ويحوي على كاشف Bromothymol blue يلقح الوسط بالبكتريا وتحضن بحرارة 37 مئوي لمدة 24 ساعة .

لون الوسط اخضر اذا البكتريا استهلكت السترات ستنتج مواد قاعدية وبوجود الكاشف سيتغير لون الوسط الى اللون الازرق .

ملاحظة:

غالبا يستخدم فحص IMVic للتفريق بين انواع البكتريا المعوية لكنه غير كافي لوحده ولاكمال التشخيص تزرع البكتريا على الاوساط التالية :

Urea agar or broth ,Kligler iron agar or TSI agar , Motility media (Semi solid mannitol)

_________________
الرجوع الى أعلى الصفحة اذهب الى الأسفل
 
IMViC TEST
استعرض الموضوع السابق استعرض الموضوع التالي الرجوع الى أعلى الصفحة 
صفحة 1 من اصل 1
 مواضيع مماثلة
-
» ESR Test
» CHI-SQUARE TEST كاي سكوير التعريف والخطوات مترجم من العربية إلي الإنجليزية
» Eleks Test
» lمعالجة مياه الشرب
» الله يرحم والدين كل مين عنده خبرة ويجاوبني بخصوص فحص الايدز HIV لان الوسواس رح يقتلني

صلاحيات هذا المنتدى:لاتستطيع الرد على المواضيع في هذا المنتدى
منتدي التحاليل الطبية فلسطين :: التحاليل الطبية :: الاحياء الدقيقة Microbiology-
انتقل الى: